பிசிஆர் என்றால் என்ன, அது ஏன் முக்கியமானது?

பிசிஆர், அல்லது பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை, டிஎன்ஏ வரிசைகளை பெருக்கப் பயன்படும் ஒரு நுட்பமாகும்.இது முதன்முதலில் 1980 களில் கேரி முல்லிஸால் உருவாக்கப்பட்டது, அவர் தனது பணிக்காக 1993 இல் வேதியியலுக்கான நோபல் பரிசு பெற்றார்.PCR மூலக்கூறு உயிரியலில் புரட்சியை ஏற்படுத்தியுள்ளது, ஆராய்ச்சியாளர்கள் டிஎன்ஏவை சிறிய மாதிரிகளில் இருந்து பெருக்கி அதை விரிவாக ஆய்வு செய்ய உதவுகிறது.

PCR என்பது மூன்று-படி செயல்முறை ஆகும், இது ஒரு வெப்ப சுழற்சியில் நடைபெறுகிறது, இது ஒரு எதிர்வினை கலவையின் வெப்பநிலையை விரைவாக மாற்றக்கூடிய ஒரு இயந்திரமாகும்.மூன்று படிகள் டினாட்டரேஷன், அனீலிங் மற்றும் நீட்டிப்பு.
 
முதல் படியில், டினாட்டரேஷனில், இரண்டு இழைகளையும் ஒன்றாக வைத்திருக்கும் ஹைட்ரஜன் பிணைப்புகளை உடைக்க இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ அதிக வெப்பநிலைக்கு (பொதுவாக சுமார் 95 டிகிரி செல்சியஸ்) வெப்பப்படுத்தப்படுகிறது.இதன் விளைவாக இரண்டு ஒற்றை இழை DNA மூலக்கூறுகள் உருவாகின்றன.
 
இரண்டாவது கட்டத்தில், அனீலிங், வெப்பநிலை சுமார் 55 டிகிரி செல்சியஸ் வரை குறைக்கப்படுகிறது, இது ப்ரைமர்களை ஒற்றை இழையான டிஎன்ஏவில் நிரப்பு வரிசைகளுக்கு இணைக்க அனுமதிக்கிறது.ப்ரைமர்கள் டிஎன்ஏவின் குறுகிய துண்டுகளாகும், அவை இலக்கு டிஎன்ஏ மீதான ஆர்வத்தின் வரிசைகளை பொருத்த வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன.
 
மூன்றாவது படி, நீட்டிப்பில், டாக் பாலிமரேஸ் (ஒரு வகை டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்) ப்ரைமர்களில் இருந்து டிஎன்ஏவின் புதிய இழையை ஒருங்கிணைக்க அனுமதிக்க வெப்பநிலை சுமார் 72 டிகிரி செல்சியஸ் வரை உயர்த்தப்படுகிறது.Taq பாலிமரேஸ் வெப்ப நீரூற்றுகளில் வாழும் ஒரு பாக்டீரியத்திலிருந்து பெறப்பட்டது மற்றும் PCR இல் பயன்படுத்தப்படும் அதிக வெப்பநிலையைத் தாங்கும் திறன் கொண்டது.

PCR இன் ஒரு சுழற்சிக்குப் பிறகு, இலக்கு டிஎன்ஏ வரிசையின் இரண்டு நகல்களாகும்.பல சுழற்சிகளுக்கு (பொதுவாக 30-40) மூன்று படிகளை மீண்டும் செய்வதன் மூலம், இலக்கு டிஎன்ஏ வரிசையின் நகல்களின் எண்ணிக்கையை அதிவேகமாக அதிகரிக்கலாம்.இதன் அர்த்தம், தொடக்க டிஎன்ஏவின் ஒரு சிறிய அளவு கூட பெருக்கப்பட்டு மில்லியன் கணக்கான அல்லது பில்லியன் கணக்கான பிரதிகளை உருவாக்க முடியும்.

 
PCR ஆராய்ச்சி மற்றும் நோயறிதலில் பல பயன்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது.மரபணுக்கள் மற்றும் பிறழ்வுகளின் செயல்பாட்டைப் படிக்க மரபியல், டிஎன்ஏ சான்றுகளை பகுப்பாய்வு செய்ய தடயவியல், நோய்க்கிருமிகளின் இருப்பைக் கண்டறிய தொற்று நோய் கண்டறிதல் மற்றும் கருவில் உள்ள மரபணுக் கோளாறுகளைக் கண்டறிய முன்கூட்டிய நோயறிதலில் இது பயன்படுத்தப்படுகிறது.
 
டிஎன்ஏவின் அளவை அளவிடவும், ஆர்என்ஏ வரிசைகளைப் பெருக்கப் பயன்படும் ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் பிசிஆர் (ஆர்டி-பிசிஆர்) போன்ற அளவு பிசிஆர் (qPCR) போன்ற பல மாறுபாடுகளில் பயன்படுத்துவதற்கும் PCR மாற்றியமைக்கப்பட்டுள்ளது.

அதன் பல பயன்பாடுகள் இருந்தபோதிலும், PCR க்கு வரம்புகள் உள்ளன.இதற்கு இலக்கு வரிசை மற்றும் பொருத்தமான ப்ரைமர்களின் வடிவமைப்பு பற்றிய அறிவு தேவைப்படுகிறது, மேலும் எதிர்வினை நிலைமைகள் சரியாக மேம்படுத்தப்படாவிட்டால் அது பிழைக்கு ஆளாகலாம்.இருப்பினும், கவனமாக சோதனை வடிவமைப்பு மற்றும் செயலாக்கத்துடன், PCR மூலக்கூறு உயிரியலில் மிகவும் சக்திவாய்ந்த கருவிகளில் ஒன்றாக உள்ளது.